1. 項(xiàng)目背景
血栓調(diào)節(jié)蛋白（thrombomodulin，TM）是1981年由Esmon等從兔肺中分離提取的一種促進(jìn)凝血酶活化蛋白C的輔助因子。
急性出血性凝血功能障礙診治專(zhuān)家共識(shí)（2020）》指出：血栓調(diào)節(jié)蛋白(Thrombomodulin, TM) 為內(nèi)皮細(xì)胞表面的凝血酶受體，抑制凝血酶的活性，增強(qiáng)蛋白C活化性能，血漿TM正常值為3.8～13.3 TU/mL。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞受損或功能障礙時(shí)，TM表達(dá)降低，部分TM被蛋白酶水解至血漿中。因此，TM是內(nèi)皮細(xì)胞受損的標(biāo)志物。TM升高提示血管內(nèi)皮損傷，可見(jiàn)于膿毒癥、腎功能受損、急性肺損傷等。下圖是血栓分子標(biāo)志物在血栓形成路徑中的作用機(jī)制。
血栓分子標(biāo)志物在血栓形成路徑中的作用機(jī)制
2. 性能表現(xiàn)
針對(duì)血栓調(diào)節(jié)蛋白的檢測(cè)，西寶生物推出4種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行抗體交叉配對(duì)驗(yàn)證）。
2.1 化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
組合1（兩試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯；
組合2（三試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內(nèi)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。
2.2 化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
組合3（兩試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶；
組合4（三試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶+鏈酶親和素磁珠（SA）
（貨號(hào)：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內(nèi)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。
化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)-三試劑組合校準(zhǔn)曲線
化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)-三試劑組合校準(zhǔn)曲線
3.臨床相關(guān)性
3.1 化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合1（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好。
3.2 化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合3（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合4（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好。
4.測(cè)試方案
4.1 化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
4.1.1抗體配對(duì)組合1（兩試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量50ul；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
4.1.2 抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量50ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記-生物素稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育9min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2 抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）：
4.2.1 抗體配對(duì)組合3（兩試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量10ul；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
4.2.2 抗體配對(duì)組合4（三試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量10ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記-生物素稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育5min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
| 貨號(hào)
| 推薦配對(duì)
|
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0940C | 血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光兩試劑配對(duì)組合1）
鏈霉親和素磁性微球（貨號(hào)：DEG0814A）+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光三試劑配對(duì)組合2）
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光兩試劑配對(duì)組合3）
鏈霉親和素磁性微球（貨號(hào)：DEG0814A）+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光三試劑配對(duì)組合4）
|
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0941C | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0940D | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0941D | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原 | EDD0760A | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1326A | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -吖啶酯濃縮液 | DKY1326B | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）-生物素濃縮液 | DKY1326C | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1326D | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
鏈霉親和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517A | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B |
1. 項(xiàng)目背景
血栓調(diào)節(jié)蛋白（thrombomodulin，TM）是1981年由Esmon等從兔肺中分離提取的一種促進(jìn)凝血酶活化蛋白C的輔助因子。
急性出血性凝血功能障礙診治專(zhuān)家共識(shí)（2020）》指出：血栓調(diào)節(jié)蛋白(Thrombomodulin, TM) 為內(nèi)皮細(xì)胞表面的凝血酶受體，抑制凝血酶的活性，增強(qiáng)蛋白C活化性能，血漿TM正常值為3.8～13.3 TU/mL。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞受損或功能障礙時(shí)，TM表達(dá)降低，部分TM被蛋白酶水解至血漿中。因此，TM是內(nèi)皮細(xì)胞受損的標(biāo)志物。TM升高提示血管內(nèi)皮損傷，可見(jiàn)于膿毒癥、腎功能受損、急性肺損傷等。下圖是血栓分子標(biāo)志物在血栓形成路徑中的作用機(jī)制。
血栓分子標(biāo)志物在血栓形成路徑中的作用機(jī)制
2. 性能表現(xiàn)
針對(duì)血栓調(diào)節(jié)蛋白的檢測(cè)，西寶生物推出4種單克隆抗體及1種抗原。具體性能如下（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行抗體交叉配對(duì)驗(yàn)證）。
2.1 化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
組合1（兩試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯；
組合2（三試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯+鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內(nèi)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。
2.2 化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
組合3（兩試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶；
組合4（三試劑模式）：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶+鏈酶親和素磁珠（SA）
（貨號(hào)：DEG0814A）；
線性范圍：1 TU/mL-200 TU/mL；最低檢出限：1 TU/mL。
樣本濃度值在3500 TU/mL以內(nèi)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)(HOOK效應(yīng))。
化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)-三試劑組合校準(zhǔn)曲線
化學(xué)發(fā)光（吖啶酯）平臺(tái)-三試劑組合校準(zhǔn)曲線
3.臨床相關(guān)性
3.1 化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合1（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好。
3.2 化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合3（兩試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)TM抗體配對(duì)組合4（三試劑模式）與希森美康 TM試劑（化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好。
4.測(cè)試方案
4.1 化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
4.1.1抗體配對(duì)組合1（兩試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量50ul；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
4.1.2 抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量50ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記-生物素稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：50ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育9min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2 抗體配對(duì)組合2（三試劑模式）：
4.2.1 抗體配對(duì)組合3（兩試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量10ul；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
4.2.2 抗體配對(duì)組合4（三試劑模式）：
待測(cè)抗原:血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原（貨號(hào)：EDD0760A）
樣本/校準(zhǔn)品:加樣量10ul；
M試劑：鏈酶親和素磁珠（SA）（貨號(hào)：DEG0814A）稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑1：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記-生物素稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合，37℃孵育5min；
第二步：加入50ul M試劑混合，37℃孵育5min，清洗；
第三步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
| 貨號(hào)
| 推薦配對(duì)
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血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0940C | 血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光兩試劑配對(duì)組合1）
鏈霉親和素磁性微球（貨號(hào)：DEG0814A）+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光三試劑配對(duì)組合2）
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）包被羧基磁珠+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光兩試劑配對(duì)組合3）
鏈霉親和素磁性微球（貨號(hào)：DEG0814A）+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）標(biāo)記生物素+血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體貨號(hào)：EKY0941C）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光三試劑配對(duì)組合4）
|
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0941C | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0940D | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體 | EKY0941D | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗原 | EDD0760A | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）-羧基磁珠濃縮液 | DKY1326A | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -吖啶酯濃縮液 | DKY1326B | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（貨號(hào)：EKY0940C）-生物素濃縮液 | DKY1326C | |
血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）抗體（EKY0941C） -堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1326D | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
鏈霉親和素磁性微球，1.5um | DEG0814A-10ml | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517A | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B |
