PNGase F是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的N-連接糖，切割的糖型有：高甘露糖、雜合和復(fù)雜寡糖，切割位點(diǎn)為：內(nèi)側(cè)的N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間。使得糖蛋白釋放以天冬酰胺連接的糖分子，并使得天冬酰胺轉(zhuǎn)化為天冬氨酸本公司PNGase是E.coli重組表達(dá)，并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。可以提供不含甘油形式，便于在HPLC方法中取得較好作用。

【酶活定義】 一個(gè)單位是指10μL的反應(yīng)體系中，37°℃反應(yīng)1小時(shí)從10μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。

【產(chǎn)品組分】

 ??PNGase F；10×變性緩沖液；10×糖苷酶緩沖液；10%NP-40

【使用方法 僅供參考】

 變性酶切

1、制備變性糖蛋白 2-20μg糖蛋白，2μl 10×糖蛋白變性Buffer，并用去離子水定溶至20μl，100度加熱10 min變性糖蛋白，然后放在冰上冷卻5 min，離心10秒。

2、去離子水溶解2-20μg變性糖蛋白，加入2μl 10×糖苷酶切緩沖液，2μl 10% NP40，500-1000U PNGase F，并用去離子水定溶至20μl。37°℃孵育1h，75℃×15min失活酶，進(jìn)行SDS-PAGE或HPLC分析。

非變性酶切

去離子水溶解一定量糖蛋白，加入2μl 10×糖苷酶切緩沖液，500-1000U PNGase F，并用去離子水定溶至20μl，37°℃孵育4h-24h，75℃×15min失活酶，進(jìn)行SDS-PAGE或HPLC分析。