疫苗生產(chǎn)過程中不可避免的有一些雜質(zhì)，如細(xì)菌菌體、細(xì)胞碎片、血清、雜蛋白、核酸等。為了得到具有高純度、無菌性和安全性的疫苗，要除去這些雜質(zhì)。
傳統(tǒng)疫苗的分離純化方法
連續(xù)離心、沉淀、過濾或萃取等物理、化學(xué)方法。我國采用酸沉淀法生產(chǎn)百日咳滅活疫苗，就是由菌體培養(yǎng)液加甲醛殺菌滅活后，用HCl調(diào)pH至3.8~4.4，靜置十幾小時自然沉淀出菌體和可溶性抗原，再離心、洗滌而得。
1 鹽析
鹽析一般是指溶液中加入無機(jī)鹽類而使某種物質(zhì)溶解度下降而析出的過程。如：加濃(NH4)2SO4使蛋白質(zhì)凝聚的過程。鹽析可以通過各種物質(zhì)的溶解度的不同進(jìn)行分離，但是溶解度相同或差異不大很難進(jìn)行分離。
2 酸沉淀
酸沉淀是指溶液的pH改變，使得溶液中某些物質(zhì)的溶解度下降，從而凝聚沉淀。過酸容易使得蛋白質(zhì)變性。
3 超速離心
蔗糖、CsCl、KBr密度梯度離心。處理樣品量太少、操作復(fù)雜、控制較難。
采用此技術(shù)純化嗜血流感細(xì)菌(Haemophilus influenzae)外膜脂蛋白P6，先連續(xù)離心(9000g)收獲菌體超聲破碎，再高速離心(21000g)沉淀出肽聚糖和含有P6的未破碎細(xì)胞，然后超速離心(100000g)除去肽聚糖，加壓透析得到目的抗原組分。
現(xiàn)代分離純化技術(shù)
膜過濾、分子篩層析、離子交換層析、親和層析等。
1 膜過濾
膜過濾是一種與膜孔徑大小相關(guān)的篩分過程，以膜兩側(cè)的壓力差為驅(qū)動力，以膜為過濾介質(zhì)，在一定的壓力下，當(dāng)原液流過膜表面時，膜表面密布的許多細(xì)小的微孔只允許水及小分子物質(zhì)通過而成為透過液，而原液中體積大于膜表面微孔徑的物質(zhì)則被截留在膜的進(jìn)液側(cè)，成為濃縮液，因而實(shí)現(xiàn)對原液的分離和濃縮的目的。
2 分子篩層析（凝膠過濾層析）
使用有一定大小孔隙的凝膠作層析介質(zhì)(如葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)，利用凝膠顆粒對分子量和形狀不同的物質(zhì)進(jìn)行分離的層析技術(shù)。由于各種分子的大小、形狀不同，擴(kuò)散到凝膠孔隙內(nèi)的速度不同，因而通過層析柱的快慢不同而分離。
3 離子交換層析
固定相是離子交換劑的層析分離技術(shù)。樣品中待分離的溶質(zhì)離子，與固定相上所結(jié)合的離子交換，不同的溶質(zhì)離子與離子交換劑上離子化的基團(tuán)的親和力和結(jié)合條件不同，洗脫液流過時，樣品中的離子按結(jié)合力的弱強(qiáng)先后洗脫。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域此法常用于分離蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子。
4 親和層析
利用分子與其配體間特殊的、可逆性的親和結(jié)合作用而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。可以選用生物化學(xué)、免疫化學(xué)或其他結(jié)構(gòu)上吻合等親和作用而設(shè)計的各種層析分離方法。如用寡脫氧胸苷酸-纖維素分離純化信使核糖核酸；用DNA-纖維素分離依賴DNA的DNA聚合酶；用瓊脂糖-抗體制劑分離抗原；用金屬螯合柱分離帶有成串組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白質(zhì)等。
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Miragen離心機(jī)系列
型號 | 主要技術(shù)指標(biāo) |
Miragen 16M微型高速離心機(jī)C0160 | ● 轉(zhuǎn)速：1000-14,000rpmrpm ● 容量可達(dá)：18 x 1.5/2.0 ml ● 離心力可達(dá)：16,000 x g ● 時間控制：1 to 30 分鐘或者連續(xù) ● "Quick"按鈕進(jìn)行瞬時啟動 |
Miragen 迷你型微孔板離心機(jī)C1000 | ● 容量：2 PCR 板 ● 轉(zhuǎn)速：2500 rpm ● 離心力：500 g ● 轉(zhuǎn)子：垂直固定 |
Miragen Mini 掌上型離心機(jī)C1301 | ● 轉(zhuǎn)速可達(dá)：6,000rpmrpm ● 容量可達(dá)：八排管轉(zhuǎn)子：2x0.2ml八排管； 標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)子：6×1.5/2.0mL ● 離心力可達(dá)：2,000 x g ● 關(guān)閉蓋子旋轉(zhuǎn)，開蓋即停止 |
Miragen 24D 微型高速離心機(jī)C2400 | ● 轉(zhuǎn)速：500-13,300rpm ● 容量可達(dá)：24 x 1.5/2.0 ml ● 離心力可達(dá)：16,300 x g ● 時間控制：1~30 minutes or continuous ● "Quick"按鈕進(jìn)行瞬時啟動 |
美國Labnet離心機(jī)系列
型號 | 優(yōu)勢 |
PCR板迷你離心機(jī) | ● 可以置于冷庫中工作 ● 快速離下掛壁液滴 ● PCR實(shí)驗(yàn)前后使用，顯著改善實(shí)驗(yàn) 結(jié)果 ● 適用帶裙邊、不帶裙邊及各種標(biāo)準(zhǔn)PCR微孔板 ● 體積不到大多數(shù)微孔板離心機(jī)體積的1/4 |
Spectrafuge 24D 微型高速離心機(jī) | ● 全新的空氣循環(huán)系統(tǒng)防止轉(zhuǎn)頭過熱 ● 轉(zhuǎn)子設(shè)計合理，有24個孔位 ● 強(qiáng)的無刷馬達(dá)驅(qū)動轉(zhuǎn)頭可以迅速加速到設(shè)定轉(zhuǎn)速 |
Prism高速臺式離心機(jī) | ● 采用無碳刷強(qiáng)電機(jī)和直觀的操作控制面板 ● 采用風(fēng)冷設(shè)計 ● 速度顯示有rpm和rcf兩種方式 ● 使用設(shè)計獨(dú)特的24x1.5/2.0mL轉(zhuǎn)子 |
Spectrafuge Mini 迷你離心機(jī) | ● 適用于微管過濾和快速離心 ● 適用于1.5mL、0.5mL和0.4mL的離心管及0.2mL八聯(lián)管、單個PCR管 ● 標(biāo)配含有轉(zhuǎn)子和適配器。 |
Spectrafuge 6C 離心機(jī) | ● 本款離心機(jī)主要是為血液分離而設(shè)計的 ● 可在冷庫中使用 ● 也適用于化學(xué)分析樣品、尿沉淀、染色體組DNA粒化等 |
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