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西寶生物KroVin300防腐劑抑菌實驗和效果 - 細菌篇

  專題推薦     |      2022-10-26
一、實驗原理    
利用抑菌劑不斷溶解經(jīng)瓊脂擴散形成不同濃度梯度，已顯示其抑菌作用。實驗通過抑菌圈大小判斷其是否具有抑菌能力。
二、實驗器材    
100mm培養(yǎng)皿、離心管、移液器、超凈臺、計數(shù)板、生理鹽水、生化培養(yǎng)箱、無菌蒸餾水、接種環(huán)、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基等。
菌種：    
自然菌液: 吸取西寶生物實驗室水槽，衛(wèi)生間下水池，一樓下水管，以及大門口的養(yǎng)魚池的水，一共大約20ml, 進行自然沉降，取上清液部分。
防腐劑：    
1.Seebio KroVin300防腐劑（共四個批次，用P1、P2、P3、P4標識）
2.某進口品牌的P**300
三、實驗步驟    
1、實驗工具準備及滅菌    
2、培養(yǎng)基制備    
稱取10.5g培養(yǎng)基干粉，加入300ml純化水，攪拌加熱煮沸至完全溶解。再加入6g的葡萄糖，攪拌溶解。向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入約20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基(約45℃)，待其冷卻，備用。
3、防腐劑配制    
用蒸餾水對不同類防腐劑分別按照1:250、1:500、1:1000、1：2000配制 ，做好標記。
4、菌懸液制備    
取適量菌種加入生理鹽水1ml,稀釋10倍，采用平板計數(shù)法，稀釋，得到10^6CFU/ml濃度菌懸液。
5、試驗菌接種    
10^6CFU/ml試驗菌懸液0.2ml,將其接種到已經(jīng)倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)，用涂布棒涂布均勻（每次使用涂布棒前酒精燈下滅菌），蓋好培養(yǎng)皿。
6、添加防腐劑    
6.1 紙片法
用鑷子將圓片約5.5mm濾紙平均放置在培養(yǎng)皿上，每個培養(yǎng)皿放置4個圓濾紙（4個防腐劑濃度用）。吸取不同種類，不同濃度的防腐劑3ul，加入到圓濾紙中，讓防腐劑溶液分布滿整個濾紙，但又不溢出，蓋好培養(yǎng)皿。
6.2 打孔法
在培養(yǎng)皿里培養(yǎng)基上打4個孔，用100ul槍頭打孔。各孔中心之間相距25mm左右，與培養(yǎng)皿邊緣相距15mm以上。每個培養(yǎng)皿為一種防腐劑的4個濃度。用微量移液器吸取防腐劑6ul到孔內(nèi)，讓防腐劑剛好齊培養(yǎng)基面，蓋好培養(yǎng)皿。
7、培養(yǎng)并觀察抑菌效果    
于37℃生化培養(yǎng)箱中正置培養(yǎng)，培養(yǎng)16-18小時觀察結(jié)果。測量抑菌圈并記錄。
四、實驗結(jié)果    
1、紙片法實驗數(shù)據(jù)和圖片
16h
防腐劑1
防腐劑2
防腐劑3
防腐劑4
P**300
1/250
2.2
2.0
1.9
2.1
1.4
1/500
1.7
1.7
1.5
1.7
1.1
1/1000
1.5
1.5
1.2
1.4
0.6
1/2000
0.6
0.8
0.9
1.2
0.5
紙片法實驗圖片    
2、打孔法實驗數(shù)據(jù)和圖片
打孔法（1/10）
16h
防腐劑1
防腐劑2
防腐劑3
防腐劑4
P**300
1/250
2.2
2.2
2.0
2.2
1.5
1/500
1.9
1.8
1.6
1.9
1.1
1/1000
1.5
1.5
1.4
1.5
0.9
1/2000
1.1
1.0
1.0
1.2
0.6
打孔法實驗圖片1/10    
打孔法（1/2）
16h
防腐劑1
防腐劑2
防腐劑3
防腐劑4
P**300
1/250
2.2
2.0
1.9
2.1
1.5
1/500
1.8
1.7
1.6
1.7
1.2
1/1000
1.5
1.4
1.3
1.5
0.9
1/2000
1.1
1.0
1.1
1.1
0.5
打孔法實驗圖片1/2    
結(jié)論    
從兩次實驗結(jié)果來看，防腐劑P1-P4的抑菌效果都是優(yōu)于對照P**300的抑菌效果。
從抑菌濃度來看，防腐劑P1-P4的1/1000的效果跟對照P**300的1/250的效果相當。
總結(jié)    
總體來看，西寶的公司KV300之P1-P4批次的抑菌效果明顯優(yōu)于P**300，1：1000～1：2000高稀釋倍數(shù)的抑菌效果差距明顯。故建議具體使用濃度視溶液營養(yǎng)份而定，但不宜稀釋過低。實驗顯示西寶KroVin300在細菌、霉菌、酵母菌的殺菌抑菌效果上明顯優(yōu)于某進口品牌的P**300。
相關文章    
免費索樣或咨詢KroVin防腐劑信息，請致電 400-021-8158聯(lián)系西寶生物。
KroVin系列防腐劑產(chǎn)品列表
物料編碼產(chǎn)品名稱包裝規(guī)格
ACN0054AKroVin 100100ml,500ml,1L
ACN0037BKroVin 30025ml,100ml,500ml,1L,5L
ACN0046AKroVin 50025ml,100ml,500ml,1L
ACN0043BKroVin 95025ml,100ml,500ml,1L,5L
ACN0911AKroVin 110025ml,500ml,5L
        如果以上防腐劑都未能滿足您的要求，可將您的樣本體系寄給我司，我們將為您定制開發(fā)。
 
一、實驗原理    
利用抑菌劑不斷溶解經(jīng)瓊脂擴散形成不同濃度梯度，已顯示其抑菌作用。實驗通過抑菌圈大小判斷其是否具有抑菌能力。
二、實驗器材    
100mm培養(yǎng)皿、離心管、移液器、超凈臺、計數(shù)板、生理鹽水、生化培養(yǎng)箱、無菌蒸餾水、接種環(huán)、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基等。
菌種：    
自然菌液: 吸取西寶生物實驗室水槽，衛(wèi)生間下水池，一樓下水管，以及大門口的養(yǎng)魚池的水，一共大約20ml, 進行自然沉降，取上清液部分。
防腐劑：    
1.Seebio KroVin300防腐劑（共四個批次，用P1、P2、P3、P4標識）
2.某進口品牌的P**300
三、實驗步驟    
1、實驗工具準備及滅菌    
2、培養(yǎng)基制備    
稱取10.5g培養(yǎng)基干粉，加入300ml純化水，攪拌加熱煮沸至完全溶解。再加入6g的葡萄糖，攪拌溶解。向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入約20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基(約45℃)，待其冷卻，備用。
3、防腐劑配制    
用蒸餾水對不同類防腐劑分別按照1:250、1:500、1:1000、1：2000配制 ，做好標記。
4、菌懸液制備    
取適量菌種加入生理鹽水1ml,稀釋10倍，采用平板計數(shù)法，稀釋，得到10^6CFU/ml濃度菌懸液。
5、試驗菌接種    
10^6CFU/ml試驗菌懸液0.2ml,將其接種到已經(jīng)倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)，用涂布棒涂布均勻（每次使用涂布棒前酒精燈下滅菌），蓋好培養(yǎng)皿。
6、添加防腐劑    
6.1 紙片法
用鑷子將圓片約5.5mm濾紙平均放置在培養(yǎng)皿上，每個培養(yǎng)皿放置4個圓濾紙（4個防腐劑濃度用）。吸取不同種類，不同濃度的防腐劑3ul，加入到圓濾紙中，讓防腐劑溶液分布滿整個濾紙，但又不溢出，蓋好培養(yǎng)皿。
6.2 打孔法
在培養(yǎng)皿里培養(yǎng)基上打4個孔，用100ul槍頭打孔。各孔中心之間相距25mm左右，與培養(yǎng)皿邊緣相距15mm以上。每個培養(yǎng)皿為一種防腐劑的4個濃度。用微量移液器吸取防腐劑6ul到孔內(nèi)，讓防腐劑剛好齊培養(yǎng)基面，蓋好培養(yǎng)皿。
7、培養(yǎng)并觀察抑菌效果    
于37℃生化培養(yǎng)箱中正置培養(yǎng)，培養(yǎng)16-18小時觀察結(jié)果。測量抑菌圈并記錄。
四、實驗結(jié)果    
1、紙片法實驗數(shù)據(jù)和圖片
16h
防腐劑1
防腐劑2
防腐劑3
防腐劑4
P**300
1/250
2.2
2.0
1.9
2.1
1.4
1/500
1.7
1.7
1.5
1.7
1.1
1/1000
1.5
1.5
1.2
1.4
0.6
1/2000
0.6
0.8
0.9
1.2
0.5
紙片法實驗圖片    
2、打孔法實驗數(shù)據(jù)和圖片
打孔法（1/10）
16h
防腐劑1
防腐劑2
防腐劑3
防腐劑4
P**300
1/250
2.2
2.2
2.0
2.2
1.5
1/500
1.9
1.8
1.6
1.9
1.1
1/1000
1.5
1.5
1.4
1.5
0.9
1/2000
1.1
1.0
1.0
1.2
0.6
打孔法實驗圖片1/10    
打孔法（1/2）
16h
防腐劑1
防腐劑2
防腐劑3
防腐劑4
P**300
1/250
2.2
2.0
1.9
2.1
1.5
1/500
1.8
1.7
1.6
1.7
1.2
1/1000
1.5
1.4
1.3
1.5
0.9
1/2000
1.1
1.0
1.1
1.1
0.5
打孔法實驗圖片1/2    
結(jié)論    
從兩次實驗結(jié)果來看，防腐劑P1-P4的抑菌效果都是優(yōu)于對照P**300的抑菌效果。
從抑菌濃度來看，防腐劑P1-P4的1/1000的效果跟對照P**300的1/250的效果相當。
總結(jié)    
總體來看，西寶的公司KV300之P1-P4批次的抑菌效果明顯優(yōu)于P**300，1：1000～1：2000高稀釋倍數(shù)的抑菌效果差距明顯。故建議具體使用濃度視溶液營養(yǎng)份而定，但不宜稀釋過低。實驗顯示西寶KroVin300在細菌、霉菌、酵母菌的殺菌抑菌效果上明顯優(yōu)于某進口品牌的P**300。
相關文章    
免費索樣或咨詢KroVin防腐劑信息，請致電 400-021-8158聯(lián)系西寶生物。
KroVin系列防腐劑產(chǎn)品列表
物料編碼產(chǎn)品名稱包裝規(guī)格
ACN0054AKroVin 100100ml,500ml,1L
ACN0037BKroVin 30025ml,100ml,500ml,1L,5L
ACN0046AKroVin 50025ml,100ml,500ml,1L
ACN0043BKroVin 95025ml,100ml,500ml,1L,5L
ACN0911AKroVin 110025ml,500ml,5L
        如果以上防腐劑都未能滿足您的要求，可將您的樣本體系寄給我司，我們將為您定制開發(fā)。