細(xì)胞培養(yǎng)在生物制藥中有著廣泛的應(yīng)用。它是一種利用細(xì)胞生長和分裂的能力來生產(chǎn)藥物的方法。通過細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，我們可以大規(guī)模地生產(chǎn)各種藥物，如蛋白質(zhì)藥物、抗體藥物和疫苗。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物制藥中的應(yīng)用不僅可以提高藥物的生產(chǎn)效率，還可以減少對動物實(shí)驗(yàn)的依賴，從而降低了藥物研發(fā)的成本。然而，細(xì)胞培養(yǎng)也面臨著一些挑戰(zhàn)，如細(xì)胞的穩(wěn)定性、培養(yǎng)條件的優(yōu)化等。因此，我們需要不斷改進(jìn)和優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，以滿足不斷增長的藥物需求。

下面是細(xì)胞培養(yǎng)的一般流程：

CHO-K1細(xì)胞是未經(jīng)改造的野生型CHO細(xì)胞，具有較高的生長速度和較好的細(xì)胞質(zhì)質(zhì)量。CHO-K1是一種無血清培養(yǎng)的細(xì)胞系，這意味著它們可以在無需添加胎牛血清的培養(yǎng)基中生長和繁殖。CHO-K1細(xì)胞具有許多優(yōu)點(diǎn)，使其成為生物制藥領(lǐng)域中較常用的細(xì)胞系之一。首先，CHO-K1細(xì)胞具有較高的蛋白質(zhì)表達(dá)能力，可以有效地表達(dá)各種外源蛋白。其次，CHO-K1細(xì)胞對許多病毒和細(xì)菌的感染性較低，這使得它們在生產(chǎn)重組蛋白和疫苗時更加安全可靠。此外，CHO-K1細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性較高，可以保持長時間的穩(wěn)定表達(dá)。

來源：Cricetulus griseus (ZG倉鼠) 卵巢 

形態(tài)：表皮細(xì)胞 

生長特性：貼壁

注釋：CHO-K1由CHO衍生而來，CHO是T. T. Puck 在1957年從一只成年ZG倉鼠卵巢獲得的。

培養(yǎng)液：Ham's F12K （含2 mM L-谷氨酰胺，1.5 g/L NaHCO3）， 10% 胎牛血清。

傳代：吸去培養(yǎng)液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會YZ胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以1：4到1：8為宜，傳代期間培養(yǎng)液更換1-2次）

凍存：95%培養(yǎng)液+5% DMSO凍存于液氮。

CHO-S細(xì)胞是一種變異的中國倉鼠卵巢細(xì)胞系，其特點(diǎn)是生長快速、易于培養(yǎng)和維持穩(wěn)定的基因表達(dá)。CHO-S細(xì)胞在生物制藥中的應(yīng)用非常廣泛，特別是在重組蛋白質(zhì)的生產(chǎn)中及單抗藥物生產(chǎn)中。由于CHO-S細(xì)胞具有較高的蛋白質(zhì)表達(dá)能力和較好的翻譯后修飾能力，使其成為理想的生產(chǎn)宿主細(xì)胞。此外，CHO-S細(xì)胞還具有較低的病毒感染率和較高的細(xì)胞存活率，使其在生產(chǎn)過程中更加可靠和穩(wěn)定。

HEK293細(xì)胞極少表達(dá)細(xì)胞外配體所需的內(nèi)生受體，且比較容易轉(zhuǎn)染，是一個很常用的表達(dá)研究外源基因的細(xì)胞株。293細(xì)胞的一個衍生株：293T/17（FBQ0507A）的轉(zhuǎn)染效率更高，成為廣大研究者研究基因功能的一個強(qiáng)大工具。

來源：人體腎臟

形態(tài)：上皮細(xì)胞 

生長特性：貼壁

注釋：該細(xì)胞含腺病毒5 DNA 。

培養(yǎng)液： MEM（ 含 2 mM L-谷氨酰胺 和 Earle's BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉）， 10% 馬血清（熱滅活）。

傳代： 吸去培養(yǎng)液。 用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會抑制胰酶的活性）。 加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。 加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。 加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以1：2到1：4為宜，傳代期間培養(yǎng)液2-3天更換1次）

凍存：95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。

Vero細(xì)胞被成功的用來培養(yǎng)狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗，在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻(xiàn)，在醫(yī)藥研究種廣泛應(yīng)用。

來源：非洲綠猴腎細(xì)胞 

形態(tài)：上皮細(xì)胞 

生長特性：貼壁

注釋：該細(xì)胞是日本千葉大學(xué)的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養(yǎng)出來的。

培養(yǎng)液：MEM（ 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉）， 10%胎牛血清

傳代：吸去培養(yǎng)液。 用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會YZ胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘，直到細(xì)胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液，用移液器把細(xì)胞吹散。加適量的細(xì)胞到新的培養(yǎng)器皿中。（以1:3至1:6為宜，傳代期間培養(yǎng)液每周更換2-3次）

凍存： 95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。

準(zhǔn)備適合細(xì)胞生長和生產(chǎn)的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基通常包含營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子、激素和其他必要的成分，以滿足細(xì)胞的需求。

將選定的細(xì)胞株接種到培養(yǎng)皿或生物反應(yīng)器中，提供適當(dāng)?shù)沫h(huán)境條件，如溫度、濕度和氧氣含量，促進(jìn)細(xì)胞的生長和分裂。

定期檢查和維護(hù)細(xì)胞的健康狀態(tài)，包括細(xì)胞密度、細(xì)胞活力和污染情況。必要時，可以進(jìn)行細(xì)胞的傳代，以保持細(xì)胞的活力和穩(wěn)定性。

通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件和添加適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)劑，促使細(xì)胞產(chǎn)生目標(biāo)藥物或生物制品，并將其分泌到培養(yǎng)基中。

IPTG（異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷）（ECJ0025D）可用于盡量增加表達(dá)載體中的基因表達(dá)。當(dāng)用抗體篩選 λ 噬菌體庫時，通過防止融合蛋白的表達(dá)直至建立菌斑塊，可以提升成功概率。

當(dāng)目標(biāo)產(chǎn)物達(dá)到一定的產(chǎn)量后，可以收獲細(xì)胞培養(yǎng)物，并進(jìn)行后續(xù)的純化和提純步驟，以獲得高純度的目標(biāo)藥物。

對收獲的產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制和分析，確保其符合規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和純度要求。

西寶生物提供高品質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑，咨詢服務(wù)熱線：400-021-8158或021-50272975。